作者简介：余娟（1984－），女，四川邻水人，广西大学轻工与食品工程学院硕士研究生，主要研究方向：糖品工业分析。 

摘要：本文建立了同时测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的高效液相－蒸发光散射检测方法。样品溶解后，采用hypersil nh2柱分离，以乙腈/水（80/20，体积比）为流动相，使用激光蒸发光散射检测器进行检测。结果表明，果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的线性范围分别为15～1500、20～1000、5～500和5～500mg/ml，检出限为0.5～4 mg/ml，样品的加标平均回收率为92.4～98.5%，相对标准偏差为2.1～3.5%。该法用于实际样品的测定，结果令人满意。

关键词：高效液相色谱；蒸发光散射监测器；蜂蜜；果糖；葡萄糖；蔗糖；麦芽糖

中图分类号：ts207.3 

蜂蜜是一种传统的营养、保健食品，其主要成分是葡萄糖、果糖以及多种活性物质。经常食用蜂蜜，能提高人体的消化功能，止咳润肺，增强机体免疫能力。因此，蜂蜜具有较高的食用价值和药用价值。

2006年3月1日，我国首个蜂蜜强制性标准gb18796-2005[1]正式实施。新标准要求，蜂蜜中果糖和葡萄糖总糖量应达到60%以上，蔗糖含量要求在5%以下。目前，蜂蜜中糖的测定方法主要有以下几种，一是以sn/t0852－2000出口蜂蜜检验方法为代表的化学法[2]；二是以aoac标准3]为代表的气相色谱法；三是以aoac标准和gb/t18932.22－2003为代表的液相色谱示差折光检测法（hplc-rid）[4]。另外，离子色谱脉冲安培法用于蜂蜜中糖的测定也略有报道[5]。

化学法操作繁琐，无选择性，且测得的葡萄糖、果糖值比实际值略高，极有可能到影响蜂蜜品质的判断[6]。气相色谱法则由于糖为未挥发性物质，需要进行衍生处理，操作繁琐。液相色谱示差折光检测法为较常用的方法，但存在示差折光检测器（rid）灵敏度低、基线噪音大、系统平衡时间长、不能进行梯度洗脱、有溶剂前伸效应、正负峰同时存在，且对室温敏感，易引起波动等缺点。相反，蒸发光散射检测器（elsd）在测量半挥发或不挥发样品的光散射之前首先把流动相蒸发掉，所以检测器的响应不受溶剂和样品特殊性质的影响，因此对糖类的灵敏度大大高于rid[7]。本文采用液相色谱法分离、蒸发光散射检测器检测，外标法定量测定蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖的含量，结果准确，单个样品测定时间为20min。

1  材料与方法

1.1  仪器设备与试剂

waters 600e 高效液相色谱仪；alltech elsd2000 检测器；labconco90008-01超纯水仪；sartorius mettler toledo al204 电子天平等。

乙腈  色谱纯；葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖标准物质（均购于sigma 公司）；实验用水  均为超纯水（电阻为18.2 mΩ·cm）。

1.2  标准溶液配制

     果糖、葡萄糖标准储备液：准确称取0.5g果糖标准物质和0.4g葡萄糖标准物质，精确至0.0001g，用乙腈+水（40+60）溶解定容到10ml容量瓶，摇匀，置于4℃冰箱中保存。

蔗糖、麦芽糖标准储备液：准确称取0.2g果糖标准物质和0.2g葡萄糖标准物质，精确至0.0001g，用乙腈+水（40+60）溶解定容到10ml容量瓶，摇匀，置于4℃冰箱中保存。

果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作溶液：吸取不同体积的果糖、葡萄糖