【摘要】目的 观察大鼠实验性脑挫伤后cns内b—app蛋白表达时空性规律。方法 采用自由落体撞击法致大鼠脑挫
伤模型，用免疫组化技术观察伤后b—app蛋白在不同时间(0．5 h、2 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d)的表达情况，并用计算机
图像分析技术作定量统计分析。结果 (1)皮质内b—app蛋白在伤后表达呈一定波动性，0．5 h表达明显增加后，逐渐下降，1
2 h降至最低，低于对照组，随后再次表达增加，3 d达高峰；(2)伤后24h海马区b一-app表达开始逐渐下降，3 d降至最低，14
d回到对照组水平；(3)齿状回(dg)内b—app蛋白在伤后12 h低于对照组。结论实验性脑挫伤后皮质b—app表达时序性
规律可为脑损伤时间推断提供一个新的参考指标，但海马区及dg13-一app变化规律在脑损伤时间推断方面价值不大。
【关键词】脑挫伤；b淀粉样前体蛋白；损伤时间；免疫组织化学；法医病理学
【中图分类号】d919．1
【文献标识码】a
【文章编号】1007一-9297(2006)02—01 15—04
a study on [3-app in experimental brain contusion in rats．he guanglong, zhou yiwu, sa dongmei, et o1．
departerment offorensic pathology,tonal medical college，hust,wuhan 430030
【abstract】obj~five to study the change of13-app in diferent wound age and site in the experimental traumatic
brain injury in rats．methods the animal model of cerebral contusion was established by impact to the parietal lobe with a free fall
weight,b—app in different wound age was observed with immunohistoehemistry． the results were measured
quantitatively with computer imaging analysis system．male spragure-dawley rats were divided into 3 groups：normal control，sham
operation control and injury group．results(1)th e number of13一app—positive neurons definitely increase in 0．5 h after brain injury．
decline gradually and reach valley bottom in 1213,，increase again and reach the peak in 3 d．(2)in hippoeampus the number of —
app—positive neurons definitely increases after 24 h after brain injury，then dechne gradually and reach valley bottom in 3d．return
to the level of control at 14 d．1,3)in dentate gyms fdg1 the number of i3-app—positive neurons at 12 h is lower than the control
after brain injury． i11e intensity of the immunoreaefivity ofp—app protein changes with time after traumatic brain injury．which might
be used for determ ing injury time．，however．，the change in hippoeampus and dg has little value in determing injury time．
【key words】cerebral contusion，3-app，injury time，immunohistochemistry，forensic pathology
近年来很多研究发现，一些神经系统的损伤，如
创伤、感染、中毒、轴索损伤及缺血等，均可影响b淀
粉样前体蛋白(beta一．amyloid precursor prot, in,p—
app)表达，国内外已有大量文献报道，但主要集中于
dai和脑缺血后损伤的研究，少见关于脑挫伤方面报
道。为此，我们应用b—app免疫组织化学技术，观察大
鼠实验性脑挫伤后在皮质和海马区表达情况。
材料与方法
一
、实验动物分组和脑损伤模型制备
44只健康sd大鼠，雌雄不限，体重300±50 g(由
同济医学院实验动物中心提供1，随机分成正常对照组
(2只)、假性手术组(2只)及脑损伤组(伤后0．5 h、2 h、
6h、12h、24h、3 d、7 d、14d、共8组，每组5只) 按照
参考文献[1】的方法，利用自由落体装置致大鼠脑挫伤
模型。
二、组织及切片处理
大鼠腹腔麻醉后，经4％多聚甲醛溶液经心脏灌
注固定后取出整个脑组织，沿挫伤灶中央作冠状切面
取材，石蜡包埋
免疫组织化学sp法按试剂盒f北京中山公司1说
【作者简介]何光龙(1978一)，福建平潭人，硕士，主要从事法医病理学方面的研究。teh 013697339034；e-mail：hg12001@163． net
[通讯作者]周亦武(1964一)，男，博士，教授；研究方向法医颅脑损伤、猝死病理及法医毒理学。tel：+86一-27—83657925；e-mail：yiwuh~j—
di遁~sina．com
[基金项目]国家自然科学基金(30570629)；中国博士后科学研究基金(2o03034459)；湖北省自然科学基金(2o03aba140)
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明书进行，一抗为兔抗大鼠b—app多克隆抗体(武汉
博士德公司)，工作浓度为1：70，以pbs替代一抗作为
阴性对照，dab(~l京中山公司1显色，苏木素复染细胞
核。
三、图像分析与统计学处理
在b—app免疫组化染色切片的顶叶皮层挫伤灶
周围、海马区及dg，各取5个视野(6708．9 rrf)，应用
hpias一1000全自动医学彩色图像分析系统测量每个
视野内p—app阳性细胞数(n)。用sas 8．0统计学软件
包对数据进行方差分析，随机组间用snk检验进行显
著性比较。
结果
法律与医学杂志2006年第13卷(第2期)
一
、he染色组织病理学改变
伤后6 h内挫伤灶周围小血管及毛细血管扩张、
淤血．组织水肿：神经元和胶质细胞