鸡冠中透明质酸的提取
[关键词] 透明质酸;粘多糖;提取;纯化
1 引言
透明质酸(hyaluronic acid)简称ha,是一种酸性粘多糖,广泛存在于动物的组织细胞间质(基质)和某些细菌的荚膜中。meyer和palmer等[1]人于1934年从牛眼玻璃体中分离出的一种高粘性物质,并随之命名为透明质酸。kendell等于1937年从细菌体内提取到ha。在临床上,透明质酸用于视网膜脱离手术,是眼科手术中必备的药品[2];同时,透明质酸是理想的保湿因子,广泛用于化妆品中[3]。
ha的生产工艺主要分为两大类[4][5],以动物组织为原料的提取法和细菌发酵法。几乎所有的动物组织中均含有ha,只是含量不同,能够用于生产的原料主要为鸡冠和人脐带。从鸡冠中生产透明质酸具有广阔的市场[6]。
1 工艺流程[7][8]
2 操作要点
2.1 预处理 新鲜公鸡冠,投入丙酮中,浸泡24h至鸡冠变硬为止,然后置瓷盘中于干燥箱干燥,干燥后用粉碎机粉碎成粉状。
2.2 提取 将粉状物倒入烧杯中,加入6~7倍去离子水,搅拌均匀,静置浸泡过夜,使鸡冠粉充分溶胀,收集滤液,滤渣再按同样方法浸泡两次,合并滤液。
2.3 除杂物 将滤液移入烧杯中,不断搅拌加入10%的固体乙酸钠,完全溶解后,加入等体积的氯仿、正丁醇溶液(氯仿:正丁醇为4:1),搅拌三小时左右,然后静置分层,虹吸出上层水相(注意千万不可吸出氯仿、正丁醇)。
2.4 沉淀 将上述水相倒入另一烧杯中,不断搅拌加入2倍体积的95%乙醇,静置沉淀过夜,虹吸出上层乙醇溶液(可回收乙醇),过滤得沉淀物,干燥后即为ha粗品。
2.5 分离 将粗品溶于4倍体积的0.1摩尔/升乙酸钠溶液中,搅拌下用2%的三氟乙酸调节溶液的ph值至4.5~5.0,加入等体积的氯仿、正丁醇溶液,搅拌均匀,静置分层后,虹吸收集上层水相,再往水相中加等体积的氯仿、正丁醇溶液,静置分层后,吸出上层水相,移入另一烧杯中。
2.6&
鸡冠中透明质酸的提取
本文2007-06-09 11:28:00发表“工矿企业”栏目。
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