[摘要] 透明质酸是一种酸性粘多糖，广泛用于眼科手术和化妆品。用蒸馏水提取、氯仿去蛋白、乙醇沉淀和纯化可以从鸡冠中获得透明质酸。

[关键词] 透明质酸；粘多糖；提取；纯化

1  引言

透明质酸（hyaluronic acid）简称ha，是一种酸性粘多糖，广泛存在于动物的组织细胞间质(基质)和某些细菌的荚膜中。meyer和palmer等[1]人于1934年从牛眼玻璃体中分离出的一种高粘性物质，并随之命名为透明质酸。kendell等于1937年从细菌体内提取到ha。在临床上，透明质酸用于视网膜脱离手术，是眼科手术中必备的药品[2]；同时，透明质酸是理想的保湿因子，广泛用于化妆品中[3]。

    ha的生产工艺主要分为两大类[4][5]，以动物组织为原料的提取法和细菌发酵法。几乎所有的动物组织中均含有ha，只是含量不同，能够用于生产的原料主要为鸡冠和人脐带。从鸡冠中生产透明质酸具有广阔的市场[6]。

1  工艺流程[7][8]

 

2  操作要点

2.1  预处理  新鲜公鸡冠，投入丙酮中，浸泡24h至鸡冠变硬为止，然后置瓷盘中于干燥箱干燥，干燥后用粉碎机粉碎成粉状。

2.2  提取  将粉状物倒入烧杯中，加入6～7倍去离子水，搅拌均匀，静置浸泡过夜，使鸡冠粉充分溶胀，收集滤液，滤渣再按同样方法浸泡两次，合并滤液。

2.3  除杂物  将滤液移入烧杯中，不断搅拌加入10％的固体乙酸钠，完全溶解后，加入等体积的氯仿、正丁醇溶液（氯仿：正丁醇为4：1），搅拌三小时左右，然后静置分层，虹吸出上层水相（注意千万不可吸出氯仿、正丁醇）。

2.4  沉淀  将上述水相倒入另一烧杯中，不断搅拌加入2倍体积的95％乙醇，静置沉淀过夜，虹吸出上层乙醇溶液（可回收乙醇），过滤得沉淀物，干燥后即为ha粗品。

2.5  分离  将粗品溶于4倍体积的0.1摩尔/升乙酸钠溶液中，搅拌下用2％的三氟乙酸调节溶液的ph值至4.5～5.0，加入等体积的氯仿、正丁醇溶液，搅拌均匀，静置分层后，虹吸收集上层水相，再往水相中加等体积的氯仿、正丁醇溶液，静置分层后，吸出上层水相，移入另一烧杯中。

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