摘要：研究了从甘蔗汁中提取出活性物质固体样品，然后用dpph（二苯代苦味酰基自由基）法测定其抗氧化活性。同时探讨了ph、浓度和增效剂对其自由基清除率的影响。结果表明，该固体样品具有较好的抗氧化活性；ph值对其抗氧化活性影响很大；浓度在1~4mg/ml范围内，其抗氧化活性变化很小；所选用的增效剂增效如抗坏血酸、柠檬酸和酒石酸作用不明显。 关键词：抗氧化活性；甘蔗汁；自由基 abstract: this paper describes extract solid sample of the active substance from cane juice, then determine its antioxidant activity by dpph assy. also study the effect of ph value, concentration and synergistic agent on radical-scavenging activity. the result showed that the solid sample have good antioxidant activity; ph value have significant effect on its activity；its activity has no change at concentration between 1~4mg/ml;the synergistic agent selected such as citric acid, tartaric acid and ascorbic acid have little effect. key word: antioxidant activity， cane juice， free radical   0 引言      抗氧化剂是指能够阻缓以至消除某些氧化作用的物质。氧化作用是自然界中普遍存在的重要化学反应。不过，有一些氧化反应是很有害的，例如食品中的脂肪氧化会使食品变质和变味。特别重要的是，近年的大量医学研究说明，人体的多种疾病和过早衰老，是由于体内过多的氧自由基(游离基)将正常细胞氧化破坏造成。抗氧化剂能够消除这些氧自由基，阻缓氧化反应，因而有良好的保健、防衰老和减少疾病的作用。       按照抗氧化剂的来源可将其分为人工合成抗氧化剂和天然抗氧化剂。人工合成抗氧化剂虽然具有显著的抗氧化作用，但其具有一定的负作用，而天然抗氧化剂却没有负作用。许多学者已经研究了从多种植物中提取天然抗氧化剂，并证明许多植物中含有抗氧化效果很好的活性物质[1，2]。据报道，甘蔗中也含有抗氧化效果显著的活性物质[3，4,5]，并初步推测出该活性物质属于多酚类[5]。本文立足从甘蔗汁中提取出固体样品，研究其抗氧化活性，探索从甘蔗原汁中提取活性物质的同时，又能对甘蔗汁起到澄清作用的一举两得的好方法。        dpph（二苯代苦味酰基自由基）在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其孤对电子在517nm附近有强吸收（显深紫色）。当有机清除剂存在时，孤对电子被配对，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程度，可评价自由基清除剂的活性。dpph·法用以评价天然抗氧化剂的抗氧化活性是一种快速（反应时间仅需20分钟左右）、简便、灵敏可行的方法[6]。   1 实验试剂原料 1.1 试剂      dpph ( ar，sigma)、无水乙醇，nacl、naoh、hcl、抗坏血酸、柠檬酸、酒石酸，以上均为分析纯。 1.2 原料 甘蔗（新台糖16号、九月份采样）汁（甘蔗取于广西大学甘蔗园，然后用小型压榨机将其榨干）；树脂：天津精细化工研究院d101   2 实验仪器与设备 紫外分光光度计（岛津uv2501型）；酸度计（雷磁phs-25型)；旋转蒸发仪（瑞典布奇）；冷冻干燥机(郑州长城fd-1ce)；层析柱。   3 实验步骤及测定方法 3.1 提取步骤     甘蔗汁先经预处理分离，除去大部分悬浮物。然后用大孔吸附树脂吸附甘蔗汁里的活性物质，之后用乙醇溶液把活性物质洗脱下来。洗脱液先经旋转蒸发，然后对其冷冻干燥，最后就可得到活性物质固体样品。 3.2 自由基消除率的测定方法       一般来讲，自由基化学性质活泼，寿命极短，但也有例外，例如二苯代苦味酰基自由基（l， 1－二苯基－2－2苦酰基dpph· ）。dpph· 法是一种简单快速的自由基分析方法，其原理是依据稳定自由基dpph· 在乙醇溶液中呈深紫色，在517nm波长处有一强吸收，自由基清除剂通过与其单电子配对使其颜色逐渐消失，如果有其它物质提供一个电子使此单电子配对，其吸收将会消失，褪色程度与其接受的电子呈定量关系。 dpph· 法能测定为数众多的天然抗氧化剂而不受葡萄糖等干扰。因此，通过吸光度的变化可以衡量试样清除自由基的能力。由于清除剂直接作用于 dpph· 自由基，反应时间仅需20min左右，操作简单，且一般分光光度计即可测定。         将活性物质固体样品配成不同浓度的溶液备用，同时用乙醇配制2×10-4mol/l的dpph·  溶液，避光保存备用。分别取2ml不同浓度的试样于试管中，加入2ml所配制的dpph· 溶液，混合均匀，