解脲支原体( ureap lasma urealyticum, uu)是引起泌尿生
殖道炎症(ngu)及男女不孕不育的主要病原体,也是性传播
的常见病原体。目前临床中常见对宫颈分泌物检测出解脲支
原体的妇女投以大量抗生素,结果是解脲支原体反复出现阳
性,称之为“解脲支原体耐药”,因此下生殖道内查到解脲支
原体者,是否皆须诊治,一直尚未完全定论。现在对特定血清
型的uu具有致病性,这种条件致病病原体进一步分群分型
是判断感染与携带的关键。故解脲支原体的基因分型研究成为国内外研究热点,现将其研究进展综述如下:
1解脲支原体概述
uu是从人体中分离的能自身繁殖的13种支原体之一,
属硬壁菌门柔膜体纲支原体目支原体科脲原体属。1954年
由shepard首先从非淋球菌性ngu患者的尿道中分离出来,
称为t株( tiny strain) 。uu介于病毒和细菌之间,是在人工
培养基上能繁殖的最小的原核细胞型微生物,无细胞壁,能自
我复制, 呈球杆状, 大小为125 ～ 250 毫微米, 分子量
4. 5 ×108 ,具高度多形性,是人类泌尿生殖道的一种常见寄生
微生物。1992年kong认为uu具有保守的氨基末端和具有
多重重复基因的羧基末端,uu的重复顺序短( < 10氨基酸)
但是数目众多。uu 的mba 抗原(multip le2banded antigen
genes,多带抗原)决定簇模拟了人类蛋白质来避免被识别,
uu的mba抗原在支原体和宿主的关系中起了关键作用。
mba抗原有如下特征: ①是被感染病人中认识的最主要抗
原; ②具有种特有性; ③具有型特异性及交叉活性片段,能被
型特异性单抗及交叉活性单抗所识别; ④不但产生于体内,也
产生于体外; ⑤负责解脲支原体某一型的高变异型; ⑥在侵袭
性解脲支原体分离物中存在,并具有表达大小的差异。uu
在遗传学上是“节俭”的而毒力较小的,利用宿主排泄废物
(尿素)的能力使其能够在宿主体内保持高水平的生物种
群[ 1 ]。特异性抗体能抑制uu生长,因其缺乏坚硬的细胞膜,
对青霉素耐药,对细胞膜有亲和性,生长繁殖时需要类固醇物
质。
2解脲支原体的致病机理
uu致病机理是: ①具有致病性的uu 可黏附在上皮细
胞、红细胞、巨噬细胞、精子等易感宿主细胞膜表面的受体上,
黏附后释放有毒的代谢产物如过氧化物和氨等,同时通过宿
主细胞膜获得脂质和胆固醇,引起细胞膜的损伤,导致宿主细
胞染色体异常,影响蛋白质和dna合成,严重者导致细胞死
亡。uu具有多种酶活性,与其毒力相关的是脲酶、iga蛋白
酶、凝脂酶a2、溶酶体; ②宿主免疫力低下,性行为不良或性
伙伴多变。目前认为uu与人体的ngu[ 2 ]、非特异性尿道炎、
生殖道感染[ 3 ]、赖特综合症、不孕不育、流产、早产[ 4, 5 ]、早产
儿呼吸窘迫综合征[ 6 ]胎膜早破、绒毛膜羊膜炎[ 7 ]、胎儿感染
与出生低体重儿[ 8 ]、死胎[ 9 ]新生儿的脑脊髓膜炎等感染、产
后发热、膀胱泌尿系结石、播散性感染等有关,在免疫低下病
人uu可引起脓肿和化脓性关节炎[ 10 ]。而新生儿尤其是极
低体重出生儿的鼻咽、支气管及肺部也可以检测到uu,并认
为其可以引起新生儿的呼吸系统疾病,是新生儿的死亡率增
加,是慢性呼吸系统疾病的一种重要病原体[ 11213 ]。uu在性
成熟无症状的女性宫颈或阴道中的分离率达40% ～80% ,作
为人群即便经过抗生素介入,降低其携带率,经过一段时间的
正常性行为,携带率也会恢复原来水平。而且生殖道的uu
是否具有致病性尚存在争议。
3解脲支原体的基因分型
uu根据分子生物学特征可分为两大生物群及14个血清
型,生物一群包括基因组较小的1、3、6、14型,曾先后命名为
u. parvum群、biovar 1群、biovar b群、parvo biovar群,目前被
重新命名为ureap lama parvum, 简称up, 占支原体感染的
90%～92%;生物二群包括剩下的10 个基因组较大的血清
型,也曾先后命名为t960 群、t2960 biovar 群、biovar2 群、
biovara群,目前被重新命名为ureap lama urealyticum,简称
uu,占支原体感染的8% ～10%。生物二群还可分为3个亚
群,亚群1为血清型2、5、8、9;亚群2为血清型4、10、12、13;
亚群3为血清型7、11。2000年在fanrong等的研究中,为进
一步阐明不同血清型的关系,他们把uu的10 个血清型的
mba基因5′端和up、uu的所有血清型基因的部分重复区域
进行排序,uu的10个血清型被分为5个mba基因型,mba
基因型a包括血清型2, 5, 8;mba基因型b包括血清型10;
mba基因型c包括血清型4、12、13,mba基因型d包括血清
型9;mba基因型e包括血清型7、11 。在每一种mba基因
型成员间没有排列顺序的差异。在robertson [ 14 ]的研究中血
清型3标准株被作为up的典型株,uu的典型株是血清型8。
在极个别情况下,极少数uu菌株的特性不符合任何一个生
物种群,例如血清型3标准株吸附红细胞的能力、还有膜外板
层、磷脂酶a、磷脂酶c、细菌敏感性都没有确立与那一个生
物种群有关。多克隆的抗血清对一或多个抗原决定簇引起的
细胞生长抑制与人类的生物一群有关,但与任何生物二群的
抗原荧光分析决定子无关。
4解脲支原体基因分型方法
4. 1抗原检测法
4. 1. 1 免疫荧光试验
这是最早使用的检测抗原方法,在固体培养的菌落上加
入特异的荧光标记的一抗或二抗,在荧光显微镜下观察结果。
该法简